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在臨床微生物檢測(cè)和研究中,樣本的采集、保存與運(yùn)輸是確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。Amies、Stuart和Cary Blair作為三種最常用的微生物轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基,各有其獨(dú)特的成分特點(diǎn)、適用菌種和最佳應(yīng)用場(chǎng)景。下面小編將為大家介紹這三種運(yùn)送培養(yǎng)基的核心區(qū)別,包括成分特性、適用范圍以及活性炭的作用,并提供針對(duì)不同樣本類型和檢測(cè)目標(biāo)的選擇建議,幫助醫(yī)療工作者和研究人員在臨床診斷、流行病學(xué)調(diào)查和微生物研究中做出最優(yōu)選擇。
三種運(yùn)送培養(yǎng)基的基本介紹
微生物樣本的采集與運(yùn)輸是臨床診斷和微生物學(xué)研究中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),而運(yùn)送培養(yǎng)基在這一過(guò)程中扮演著不可或缺的角色。Amies、Stuart和Cary Blair作為三種最常用的運(yùn)送培養(yǎng)基,各自有著獨(dú)特的發(fā)展歷史和設(shè)計(jì)目的,了解它們的基本特性是正確選擇和使用的基礎(chǔ)。

Amies運(yùn)送培養(yǎng)基是對(duì)原始Stuart培養(yǎng)基的重要改進(jìn)。這種半固體運(yùn)送培養(yǎng)基用無(wú)機(jī)磷酸鹽緩沖液替代了原有的甘油磷酸鹽,并添加了活性炭成分,顯著提高了對(duì)淋病奈瑟菌等苛養(yǎng)菌的保存效果。
Amies培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)特點(diǎn)是多功能性,可用于多種微生物的保存和轉(zhuǎn)運(yùn),包括厭氧菌、需氧菌和苛養(yǎng)菌等,其配方中的緩沖劑和穩(wěn)定劑使其特別適合混合菌群樣本的保存,這種精心設(shè)計(jì)的組成使Amies培養(yǎng)基成為目前應(yīng)用范圍最廣的通用型運(yùn)送培養(yǎng)基之一。
Stuart運(yùn)送培養(yǎng)基是這三種培養(yǎng)基中歷史最悠久的,其設(shè)計(jì)初衷是為了滿足對(duì)苛養(yǎng)菌特別是淋病奈瑟菌的運(yùn)輸需求。
與Amies培養(yǎng)基相比,Stuart培養(yǎng)基最初使用甘油磷酸鹽作為緩沖系統(tǒng),這一成分后來(lái)被發(fā)現(xiàn)可能被某些腐生菌代謝,從而影響運(yùn)輸效果。
Stuart培養(yǎng)基的非營(yíng)養(yǎng)性配方能有效抑制雜菌的過(guò)度生長(zhǎng),而其含活性炭的版本更能中和樣本中的抑制劑,顯著延長(zhǎng)目標(biāo)病原體的存活時(shí)間。這種培養(yǎng)基特別適用于奈瑟氏菌屬、肺炎鏈球菌、白喉?xiàng)U菌等對(duì)運(yùn)輸條件要求較高的病原體。
Cary Blair運(yùn)送培養(yǎng)基則是對(duì)Stuart培養(yǎng)基配方的又一次重要改進(jìn),專門針對(duì)腸道致病菌的運(yùn)輸需求而開發(fā)。這種培養(yǎng)基去除了可能被代謝的甘油磷酸鹽緩沖系統(tǒng),改用更穩(wěn)定的無(wú)機(jī)磷酸鹽緩沖液,并調(diào)整pH至8.4的弱堿性環(huán)境,以適應(yīng)對(duì)酸特別敏感的弧菌等腸道病原體。
Cary Blair培養(yǎng)基的核心成分包括氯化鈉維持滲透壓,巰基乙酸鈉保持還原環(huán)境,磷酸二鈉和氯化鈣平衡pH,以及少量瓊脂提供半固體稠度。這種精心優(yōu)化的配方使其成為糞便樣本中腸道病原體運(yùn)輸?shù)狞S金標(biāo)準(zhǔn)。
這三種培養(yǎng)基均可制成固體、半固體或液體形式,以適應(yīng)不同的采樣和運(yùn)輸需求。半固體形式因其既能限制微生物運(yùn)動(dòng)防止交叉污染,又便于采樣拭子的插入和樣本釋放,成為臨床最常用的形態(tài)。液體運(yùn)送培養(yǎng)基適合需要大量培養(yǎng)物的情況,而固體形式則更適用于微生物的分離和計(jì)數(shù)。理解這些基本特性和發(fā)展歷史,有助于我們更好地掌握這三種運(yùn)送培養(yǎng)基的適用場(chǎng)景和優(yōu)勢(shì)局限。
Amies追求廣泛適用性,Stuart專注于苛養(yǎng)菌的保存,而Cary Blair則專門針對(duì)腸道環(huán)境的特殊挑戰(zhàn)。這種配方上的差異化使它們能夠在各自的專業(yè)領(lǐng)域提供最佳的樣本保存效果。

Amies Stuart Cary Blair運(yùn)送培養(yǎng)基選擇指南:
Amies培養(yǎng)基以其廣泛的適用性著稱,能夠支持多種需氧菌、厭氧菌和苛養(yǎng)菌的存活。特別適合混合菌群樣本的保存,如傷口感染、膿腫分泌物等可能同時(shí)包含需氧菌和厭氧菌的復(fù)雜樣本。Amies培養(yǎng)基含活性炭的版本還能有效支持奈瑟氏菌屬、肺炎球菌、鏈球菌、白喉?xiàng)U菌等對(duì)運(yùn)輸條件要求較高的苛養(yǎng)菌。在樣本類型上,Amies培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于咽拭子、鼻拭子、傷口分泌物、泌尿生殖道樣本等多種臨床標(biāo)本的采集和運(yùn)輸。
Stuart培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)更專注于苛養(yǎng)菌的保存,尤其是淋病奈瑟氏菌。研究顯示,Stuart培養(yǎng)基(特別是含活性炭版本)能顯著提高淋球菌等苛養(yǎng)菌的檢出率。除淋球菌外,Stuart培養(yǎng)基還對(duì)肺炎鏈球菌、白喉?xiàng)U菌、沙門氏菌和志賀氏菌有較好的保存效果。在臨床應(yīng)用上,Stuart培養(yǎng)基是疑似淋病奈瑟菌感染時(shí)的首選運(yùn)輸介質(zhì),也常用于咽喉、陰道及傷口樣本中苛養(yǎng)菌的保存。與Amies相比,Stuart培養(yǎng)基在混合菌群樣本中的表現(xiàn)稍遜,但對(duì)特定苛養(yǎng)菌的保存效果更為出色。
Cary Blair培養(yǎng)基是腸道病原體運(yùn)輸?shù)狞S金標(biāo)準(zhǔn),專門針對(duì)糞便、肛周及直腸樣本設(shè)計(jì)。其弱堿性(pH8.4)和無(wú)營(yíng)養(yǎng)的配方特別適合對(duì)酸敏感的霍亂弧菌、空腸彎曲菌等腸道致病菌。
臨床考慮與選擇策略
在實(shí)際臨床工作中,選擇運(yùn)送培養(yǎng)基還需考慮以下因素:
標(biāo)本類型與來(lái)源部位:不同解剖部位的正常菌群和潛在病原體差異很大。例如,糞便標(biāo)本首選Cary-Blair;生殖道標(biāo)本可選Amies或Stuart;而多部位篩查可能選擇通用性更強(qiáng)的Amies培養(yǎng)基。
目標(biāo)病原體特性:了解疑似病原體的生長(zhǎng)需求是關(guān)鍵??琉B(yǎng)菌(如淋球菌、嗜血桿菌)需要含活性炭的培養(yǎng)基;弧菌類需要堿性環(huán)境;而厭氧菌則需要低氧化還原電位的條件。
轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間與條件:當(dāng)標(biāo)本運(yùn)輸時(shí)間可能超過(guò)24小時(shí)時(shí),含活性炭的配方通常能更好地維持病原體活力。

何時(shí)選擇含活性炭:
樣本可能含有抑制劑:當(dāng)樣本可能受到消毒劑、抗生素或其他藥物污染時(shí),如泌尿生殖道樣本可能含有殘留的抗生素或消毒劑。
苛養(yǎng)菌的轉(zhuǎn)運(yùn):對(duì)于淋病奈瑟氏菌、彎曲菌、嗜血桿菌等特別脆弱的微生物,含活性炭版本可以顯著提高檢出率。
長(zhǎng)途運(yùn)輸或延遲檢測(cè):如果運(yùn)輸時(shí)間較長(zhǎng)或距離較遠(yuǎn),活性炭可以在運(yùn)送期間持續(xù)吸附有害物質(zhì),有助于保持微生物的活性。
復(fù)雜環(huán)境樣本:從可能存在多種抑制物質(zhì)的環(huán)境中采集的樣本,如傷口分泌物、含有大量雜菌的樣本等。
何時(shí)選擇不含活性炭:
常規(guī)樣本檢測(cè):對(duì)于普通樣本,沒有特殊污染風(fēng)險(xiǎn)時(shí)。
需要后續(xù)分離培養(yǎng):如果計(jì)劃從培養(yǎng)基中分離微生物進(jìn)行進(jìn)一步研究或檢測(cè),不含活性炭的培養(yǎng)基可能減少干擾。

特定微生物檢測(cè):某些微生物可能被活性炭吸附,影響后續(xù)檢測(cè)結(jié)果。
成本考量:含活性炭的培養(yǎng)基通常成本較高,在不需要特殊保護(hù)時(shí)可以選用常規(guī)版本。
Cary-Blair培養(yǎng)基通常不含活性炭,因?yàn)槠涓遬H值和特殊配方已經(jīng)能夠很好地保護(hù)腸道致病菌。但在某些特殊配方中,也可能添加活性炭以增強(qiáng)對(duì)特定腸道病原體的保護(hù)作用。
